Origami 2(DE3)感受态细胞
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Origami 2(DE3)感受态细胞
Origami 2(DE3) Competent Cells
编号
名称
规格
单位
北京华越洋WR4442s
Origami 2(DE3)感受态细胞
10×100ul
包
北京华越洋WR4442
Origami 2(DE3)感受态细胞
20×100ul
包
Origami 2(DE3)感受态细胞基本信息：
Origami 2(DE3)基因型:
菌株类型:
E.coli
培养基:
LB培养基
生长条件:
37 ℃, 有氧
抗性:
链霉素，四环素
应用:
蛋白表达, 含二硫键蛋白表达
质粒转化条件：
42 ℃ 热激
诱导方法:
IPTG
菌株特点:
Origami 2系列感受态细胞是K-12细胞的衍生而来，在thioredoxin reductase (trxB)和glutathione reductase (gor)基因上同时含有突变，这使得该菌株能够更加高效的在细胞质内生成二硫键，有助于含二硫键蛋白的活性蛋白形成。
与Origami系列感受态相比，Origami 2系列感受态细胞是卡那敏感的，这使得该菌株能够适用于大多数的Novagen公司的蛋白表达质粒。Gor基因突变使得该菌株DE3是溶源性的 λDE3, 所以在lacUV5启动子下携带有T7 RNA聚合酶的染色体拷贝。该菌株适用于pET系列载体，及其他T7启动子系列载体。亮氨酸生长缺陷型宿主菌。
Origami 2(DE3)感受态细胞操作方法：
1. 取100μl冰上融化的BL21（DE3）感受态细胞，加入目的质粒并轻轻混匀，冰上静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基（2YT或LB），混匀后37℃，200rpm复苏60分钟。
4. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5. 将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。
华越洋其他感受态细胞：
OrigamiB,OrigamiB(DE3),OrigamiB(DE3)pLysS,OrigamiB(DE3)pLacI
