半纤维素含量检测试剂盒
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半纤维素含量检测试剂盒
可见分光光度法
注意:正式测定之前选择2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
规格:50T/48S
半纤维素含量检测试剂盒
溶液的配制:
- 试剂一:80%乙醇自备;
2、 标准品:10 mg D-木糖。临用前加入 1 mL 蒸馏水溶解配制成 10 mg/mL 的标准溶液。2-8℃保存 4 周。
产品说明:
半纤维素是指在植物细胞壁中与纤维素共生、可溶于碱溶液,遇酸后远较纤维素易于水解的那部分植物多糖,广泛存在于植物中,其分布因植物种属、成熟程度、早晚材、细胞类型及其形态学部位的不同而有很大差异。一种植物往往含有几种由两或三种糖基构成的半纤维素,其化学结构各不相同。半纤维素是一种新型的可利用能源。
半纤维素在一定条件下水解为还原性糖类,还原糖在碱性条件下与3,5-二硝基水杨酸(DNS)加热被氧化成糖酸及其它产物,DNS则被还原为棕红色3-氨基-5-硝基水杨酸,在540nm处具有特征吸收峰,通过吸光值的变化即可定量检测半纤维素的含量。
技术指标:最低检出限:0.2311 mg/mL
线性范围:0.4-2.5 mg/mL
需自备的仪器和用品:
天平、可见分光光度计、台式离心机、恒温水浴锅、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵、30~50目筛、蒸馏水、EP管。
半纤维素含量检测试剂盒
操作步骤:
- 样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)
样本自然风干或用烘箱烘干至恒重,研钵充分研磨后,过 30~50 目筛。
二、测定步骤
1.分光光度计预热30 min以上,调节波长至540 nm,蒸馏水调零。
2.标准液的稀释:将10 mg/mL的标准溶液用蒸馏水稀释至2.5、2、1、0.8、0.6、0.4 mg/mL标准溶液待测。
3.标准液稀释可参考下表:
备注:实验中每个标准管需 125µL 标准溶液。
4、 操作表(在1.5 mL EP管中操作):
- 半纤维素含量计算
- 标准曲线的绘制:
根据标准管的浓度(y,mg/mL)和吸光度ΔA标准(x,ΔA标准),建立标准曲线。根据标准曲线,将ΔA测定(x,ΔA测定)带入公式计算样本浓度(y,mg/mL)。
- 半纤维素含量的计算:
半纤维素含量(mg/g 干重)= y×V样总÷W×F= y÷W×F
V样总:加入提取液体积,1 mL;W:样本质量,g;F:稀释倍数。
半纤维素含量检测试剂盒
注意事项:
- 如果测定吸光值超过线性范围吸光值,可以增加样本量或者稀释样本后再进行测定。
2、建议将加入提取液二离心后的上清液稀释10~20倍后检测。计算公式中注意乘以稀释倍数。