酵母∆ycf1感受态细胞，△ycf1

酵母∆ycf1感受态细胞，△ycf1

∆ycf1 Chemically Competent Cell

产品规格 （hyyBB09）

∆ycf1 Competent Cell:                                 100μl/支              保存：  -80℃（3个月）

pYES2 (control vector, 10 ng/μl)                          10μl              保存：-80℃（12个月）

Carrier DNA (10 μg/μl)                                     100μl              保存：-20℃（12个月）

PEG/LiAC:                                                   5ml              保存：    4℃（12个月）

酵母∆ycf1感受态细胞

基因型

MATa his3Δ1 leu2 met15Δ ura3-52 YCF1::kanMX4 YDR135c

酵母∆ycf1感受态细胞

产品说明

∆ycf1菌株来源于BY4741酵母菌株，将酵母菌内源的YCF1基因突变，即为∆ycf1。YCF1(Yeast Cadmium Factor 1/酵母镉因子1)可将重金属和谷胱甘肽螯合到液泡中对抗细胞应激反应，广泛参与到各种重金属（砷、镉、汞、铜、锰、锌等）的吸收、转运过程中，∆ycf1是研究各种重金属相关基因功能的常用菌株。筛选标记(Transformation marker)为：trp1，leu2，ura3，可配合诱导型质粒pYES2、pESC-HIS/LEU/TRP/URA或组成型表达质粒pGBKT7/ pGADT7等使用。∆ycf1感受态细胞经特殊工艺制作，-80℃可保存三个月，pYES2质粒（5857bp，AmpR）检测转化效率>104 cfu/μg DNA。

酵母∆ycf1感受态细胞

操作方法

1. Carrier DNA 的预处理：将Carrier DNA 插入95℃金属浴5 min或插入浮漂中95℃水浴3 min，加热后快速插入冰中。

2. 取100 µl冰上融化的∆ycf1感受态细胞，依次加入预冷的目的质粒2-5 µg，预处理后的Carrier DNA 10 µl，PEG/LiAc 500 µl并吸打几次混匀，30℃水浴30 min (15 min时翻转6-8次混匀)。

3. 将管放42℃水浴15 min (7.5 min时翻转6-8次混匀)。

4. 5000 rpm离心 40 s弃上清，ddH2O 400 µl 重悬，离心 30s弃上清。

5. ddH2O 50 µl重悬，涂板（筛选平板可根据转化质粒的筛选标记选择SD缺陷型平板），29℃培养48-96 h。

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