2×Pfu PCR MasterMix
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2×Pfu PCR MasterMix使 用 说 明 书
产品组成、储存、浓度：
目录编号
组成
（含染料）hyy032
（含染料）hyy032B
（不含染料）hyy031
（不含染料）hyy031B
2×Pfu PCR
Master Mix
1ml
5ml
ddH2O
1ml
5ml
储存：－20 ℃ 保存。浓度： 0.1U/µl
制品说明：本产品包含Pfu DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液，浓度为2×。具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点，可最大限度的减少人为误差。适用与高保真PCR反应、复杂模板如GC含量高(>60%)，有二级结构等的扩增和大规模的基因检测。
本产品使用方便快捷，能避免 PCR 操作过程中的污染，使用时只需取适量2×Pfu PCR MasterMix溶液，加入模板和引物，并加入去离子水补足体积，使MasterMix溶液浓度为1×即可进行反应。使用前请保证充分溶解并混匀，操作需在冰上进行。
产品内容：Pfu DNA Polymerase (recombinant)：0.05units/µl ；MgCl2： 4mM ；dNTPs (dATP, dCTP, dGTP, dTTP)：0.4mM
质量控制：经检测无外源核酸酶活性；PCR方法检测无宿主残余 DNA ；能有效地扩增人基因中的单拷贝基因；室温存放一周，无明显活性改变。
适用范围：基因检测：本产品不同批次之间误差很小，特别适合大规模基因检测，半定量PCR实验和微量DNA的检测。
高保真DNA扩增:如表达基因的克隆、基因的定点突变、细胞内基因点突变的分析(SNP)和末端补平。PCR产物为平端，纯化后可加A处理再与TA载体连接或使用平末端克隆载体。
反应举例：（提示：以下举例仅供参考。实际反应条件因模板、引物等的结构不同而各异，需根据实际情况，设定最佳反应条件。）
1．用2×Pfu PCR MasterMix产品，以人基因组DNA为模板，扩增1kb的片段，反应体系为25µl（如反应体系不同，可按此比例增加或减少用量）。
Template
10pg-1µg
Primer 1
0.1-1µl
Primer 2
0.1-1µl
2×MasterMix
12.5µl
ddH2O
补至25µl
2．PCR 反应循环的设置：
94oC: 3 min
94oC: 30 sec55oC: 30 sec 30 cycles
72oC: 0.5-1kb/min
72oC: 5 min
以质粒为模板扩增，一般1kb/min就足够了。
3．结果检测：反应结束后取5µl反应产物，琼脂糖凝胶电泳检测。
