XL1-RED感受态细胞

hyyrb-09

产品简介

XL1-Red具有良好的重组能力（recA+），但在丰富培养基（如 LB）中生长慢，繁殖时间为 90-120 min。XL1-Red携带编码四环素抗性基因的 TN10 转座子；因此，产生的转化物可能不具有四环素抗性。然而，由于快速的突变型，细胞将经常产生四环素敏感（Tets）变体。

产品组成

组分 XL1-RED化学感受态细胞

100 × 100 μL

定制基因型：endA1 gyrA96 thi-1 hsdR17 supE44 relA1 lac mutD5 mutS mutT Tn10 (TetR)

存储条件

-80 ℃保存；请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。

质量控制

无外源质粒 DNA 残留；

化学法转化效率≥106 cfu/μg pUC18 DNA。

使用方法

1.将感受态细胞从-80 ℃中取出，置于冰浴中融化；

2.将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中，轻轻弹匀，冰上孵育 30 min；

3.将离心管置于 42 ℃水浴锅中，不要晃动，热激 90s 后，立刻置于冰浴中静置 2-3 min；

4.向离心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培养基（室温或 37 ℃预热），后置于37 ℃摇床复壮 45 min；

5.取不同体积的转化产物，用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上，于 37 ℃培养箱培养过夜。

注意事项

1. 感受态细胞冰浴中解冻后应立即使用；

2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10；

3. 加入待转化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受态细胞，仅用手指轻弹即可；

4. 为确保高转化效率，整个操作过程中除热激外均要保持低温，并且要尽量轻柔。