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酵母△fet3fet4 感受态细胞

酵母△fet3fet4 感受态细胞
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    HYYPB2400

    fet3fet4            100μl×10 支 保存:-80℃(12 个月)

    Carrier DNA (10 μg/μl)  50μl      保存:-20℃(12 个月)

    PEG/LiAC           5ml 保存:    RT12 个月)

    fet3fet4产品说明

    fet3fet4 是敲除酿酒酵母内源 fet3 fet4 的菌株, 主要通过

    酵母互补实验用于检测蛋白铁转运功能。

    fet3fet4其基因为:MATaade2-1 can1-100 ura3-11 leu2-3 leu2-112 trp1-1 ura3-1

    fet3::Leu fet4::Trp

    fet3fet4感受态细胞操作方法

    1. 取一支无菌的 1.5ml EP 管,依次加入预冷的目的质粒 1-3μg

    Carrier DNA 5μl 100μl 冰 上 融 化 的 △ fet3fet4 感 受 态 细 胞 ,

    PEG/LiAc 500μl,轻轻翻转混匀 6-8 次;

    2. 30℃水浴 30min,每 15min 轻轻翻转混匀 6-8 次;

    3. 42℃水浴 15min,每 7.5min 轻轻翻转混匀 6-8 次;

    4. 12000rpm 瞬时离心弃上清,用 100μl 0.9% NaCl ddH2O 重悬,

    涂板,30℃培养 48-96h

    fet3fet4感受态细胞注意事项

    1. 使用 Carrier DNA 前,请把装有 Carrier DNA 的管子在沸水中煮

    5min,然后立即放在冰上,用后放在-20℃储存备用。

    2. PEG 溶液在低温环境下会析出,请于常温下完全溶解后使用。

    3. 转化全程要无菌操作。

    4. 12000rpm 瞬时离心指离心速度升到 12000rpm 时立即停止离心。

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