毕赤酵母X33感受态细胞

毕赤酵母X33感受态细胞

产品规格：

X33                    100ul/支     保存:-80℃

Carrier DNA(10ug/ul)   50ul         保存:-20℃

毕赤酵母转化液         5ml          保存:4℃

毕赤酵母X33感受态细胞

操作方法：

1.取需转化质粒 5ug，酶切，回收;

2.取一支无菌的 1.5ml EP 管，依次加入预冷的线性质粒 1-5ug(体积不高于 15 ul)，Carrier DNA 5ul，100ul冰上融化的 X33 感受态细胞，毕赤酵母转化液 500ul，轻轻翻转混匀 6-8 次;

3.30℃水浴30min，每10min 轻轻翻转混匀6-8次;

4.每支加入20ul的二甲基亚砜;

5.42℃水浴15min，每5min 轻轻翻转混匀6-8次;

6.12000rpm 瞬时离心弃上清，每支加1ml的YPG于30℃复苏1h;

7.12000rpm 瞬时离心弃上清，用 100u1 0.9% NaC1重悬，涂板，30℃培养 48-96h。

毕赤酵母X33感受态细胞

注意事项：

1. 使用 Carrier DNA 前，请把装有 Carrier DNA 的管子在沸水中煮沸 5min，然后立即放在冰上，用后放在-20℃储存备用。
2. 转化液低温环境下会析出，请于常温下完全溶解后使用。
3. 转化全程要无菌操作。
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