毕赤酵母X33感受态细胞
毕赤酵母X33感受态细胞
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毕赤酵母X33感受态细胞
产品规格:
X33 100ul/支 保存:-80℃
Carrier DNA(10ug/ul) 50ul 保存:-20℃
毕赤酵母转化液 5ml 保存:4℃
毕赤酵母X33感受态细胞
操作方法:
1.取需转化质粒 5ug,酶切,回收;
2.取一支无菌的 1.5ml EP 管,依次加入预冷的线性质粒 1-5ug(体积不高于 15 ul),Carrier DNA 5ul,100ul冰上融化的 X33 感受态细胞,毕赤酵母转化液 500ul,轻轻翻转混匀 6-8 次;
3.30℃水浴30min,每10min 轻轻翻转混匀6-8次;
4.每支加入20ul的二甲基亚砜;
5.42℃水浴15min,每5min 轻轻翻转混匀6-8次;
6.12000rpm 瞬时离心弃上清,每支加1ml的YPG于30℃复苏1h;
7.12000rpm 瞬时离心弃上清,用 100u1 0.9% NaC1重悬,涂板,30℃培养 48-96h。
毕赤酵母X33感受态细胞
注意事项:
- 使用 Carrier DNA 前,请把装有 Carrier DNA 的管子在沸水中煮沸 5min,然后立即放在冰上,用后放在-20℃储存备用。
- 转化液低温环境下会析出,请于常温下完全溶解后使用。
- 转化全程要无菌操作。
- 毕赤酵母X33感受态细胞,大量现货