SD-ade-his-leu-trp broth

SD-ade-his-leu-trp broth  5L  四缺筛选培养基

配方=YNB+硫酸铵+葡萄糖+缺ade&his&leu&trp&氨基酸混合

Minimal SD Base （如需配成固体，请在灭菌前再加入2%的酵母专用 Agar）

1. 在1L 去离子水中加入26.7g 的 Minimal SD Base，然后再加入1.3g DO 类缺陷培养基，搅拌溶解；

2. 调节 pH 至5.8，121℃高压灭菌15min；

3. 室温冷却后使用，或避光、室温条件下储存灭菌培养基。

Minimal SD Agar Base

1. 在1L 去离子水中加入46.7g 的 Minimal SD Base，然后再加入相应量的缺陷氨基酸，搅拌溶解；

2. 调节 pH 至5.8，121℃高压灭菌15min；

3. 冷却到50℃把培养基倒入平板中，室温使其凝固后使用，或封口膜封好后倒置保存在4℃冰箱。

DO 类缺陷培养基的配制 （如需配成固体，请在灭菌前再加入2%的酵母专用 Agar）

1. 在1L 去离子水中加入相应量的 DO 培养基，然后再加入26.7g Minimal SD Base，搅拌溶解；

2. 调节 pH 至5.8，121℃高压灭菌15min；

3. 室温冷却后使用，或4℃冰箱避光储存已经灭菌的液体培养基。

或：1. 在900ml 去离子水中加入相应量的 DO 培养基，然后再加入6.7g YNB，搅拌溶解；

2. 调节 pH 至5.8，121℃高压灭菌15min；

3. 4℃冰箱避光储存已经灭菌的液体培养基；

4. 使用时再加入100ml 已灭菌的20%葡萄糖。

SC 类缺陷培养基的配制 （如需配成固体，请在灭菌前再加入2%的酵母专用 Agar）

1. 在1L 去离子水中加入相应量的 SC 培养基，然后再加入20g 葡萄糖，搅拌溶解；

2. 调节 pH 至5.8，121℃高压灭菌15min；

3. 室温冷却后使用，或4℃冰箱避光储存已经灭菌的液体培养基；

或：1. 在900ml 去离子水中加入相应量的 SC 培养基，搅拌溶解；

2. 调节 pH 至5.8，121℃高压灭菌15min；

3. 4℃冰箱避光储存已经灭菌的液体培养基；

4. 使用时再加入100ml 已灭菌的20%葡萄糖。

SD 类缺陷培养基的配制（如需配成固体，请在灭菌前再加入2%的酵母专用 Agar）

1. 在1L 去离子水中加入相应量的 SD 培养基，搅拌溶解；

2. 调节 pH 至5.8，121℃高压灭菌15min；

3. 室温冷却后使用，或4℃冰箱避光储存已经灭菌的液体培养基。

SD with Agar 类缺陷培养基的配制

1. 在1L 去离子水中加入相应量 SD with Agar 培养基，搅拌溶解（琼脂在高温灭菌后溶解）；

2. 调节 pH 至5.8，121℃高压灭菌15min；

3. 冷却到50℃把培养基倒入平板中，室温使其凝固后使用，或封口膜封好后倒置保存在4℃冰箱。

注意事项：

1. 在配制酵母缺陷培养基时，培养基会变色，由浅黄到深褐色不等，对酵母的生长不会产生严重影响。

2. DO 类和 SC 类培养基均不含葡萄糖。葡萄糖高温灭菌会有碳化现象，控制好灭菌温度和时间，葡萄糖的微量碳化对实验并无太大影响。如有特殊要求可将20%葡萄糖单独灭菌，待使用时再加入。

3. 缺陷培养基的 PH 值在5.5-6.5范围内都是比较适合酵母生长的。