YPD Plus培养基,YPDPlus Medium
YPD Plus培养基,YPD Plus Medium
-
YPD Plus培养基,YPD Plus Medium
关于YPD Plus Medium:
酵母杂交文库筛库对于感受态细胞的转化效率要求比较高。一般有以下几个方法来提高转化效率。YPD Plus培养基,YPD Plus Medium
1.使用变性的Carrier DNA作为担体DNA。
2.选用生长状态良好的酵母菌并适当增加菌种密度。
3.提高质粒的纯度浓度。普因特生物的 YPD Plus(PT1004)在此基础上,增加转化后活化复苏步骤,可以将转化效率有效提高约50%-100%。
YPD Plus培养基,YPD Plus Medium
使用方法:
1.5mL体系:
1. 常规LiAc转化方法完成转化。适用于本公司酿酒酵母感受态制备及转化试剂盒。
2. 转化产物1000g 离心弃上清,用1 mL YPD Plus悬浮沉淀,30℃摇床震荡培养60min。
3. 1000g 离心5min。加入1mL无菌0.9%NaCl重悬菌体。
4. 分别稀释10倍,100倍后涂布于相应的缺陷型培养基上。
5. 30℃恒温培养3-5天。
15mL体系:
1. 常规LiAc转化方法完成转化。适用于本公司酿酒酵母感受态制备及转化试剂盒。2. 转化产物1000g 离心弃上清,用3 mL YPD Plus悬浮沉淀,30℃摇床震荡培养90min。
3. 1000g 离心5min。加入15mL无菌0.9%NaCl重悬菌体。
4. 分别稀释10倍,100倍后涂布于相应的缺陷型培养基上。
5. 30℃恒温培养3-5天。
YPD Plus培养基,YPD Plus Medium