葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD 比色法)

葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD 比色法)

产品简介:

葡萄糖(Glucose,Dextrose，Glu)又称玉米葡糖，简称葡糖，化学式C₆H₁₂O₆,分子量为180.16，是自然界分布最广、最重要的一种单糖，属于多羟基醛，用酶学方法测定葡萄糖是生化检测中的常用方法，最常用的有葡萄糖氧化酶法、己糖激酶法，上述酶学法特点是：

1、灵敏度、准确度、精密度均高; 2、使用温和的反应条件; 3、对葡萄糖有专一性，不受其他糖及还原物的干扰; 4、操作简便; 5、适用于自动分析仪。

葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD比色法)又称葡萄糖氧化酶法或葡萄糖氧化酶-过氧化物酶偶联法等，其检测原理是在葡萄糖氧化酶的催化下，葡萄糖被氧化成葡萄糖酸，同时消耗溶液中的氧，产生的过氧化氢与氧化色原物质反应生成红色的醌类化合物，初始反应中过氧化氢的生成量与葡萄糖浓度成正比，分光光度计505nm进行比色测定，专门用于人或动物的血清、血浆、脑脊液、细胞、组织等样本中的葡萄糖含量定量测定，但不宜直接检测尿液中的葡萄糖含量,其中Glu标准(5mmol/L)=90mg/dl。该试剂盒仅用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途。

自备材料:

1、生理盐水或 PBS

2、离心管、匀浆机、离心机、水浴锅或恒温箱、分光光度计、1.0ml 比色皿

操作步骤(仅供参考):

1、样本处理:

①血清、血浆、脑脊液样品:从待测样品中分离出的血清或血浆不应有溶血，直接测定，如超过线性范围(30mmol/L)，用生理盐水或 PBS稀释后测定。

②细胞样品:

1. 取适量的细胞(一般推荐>10⁶以上)，1000g 离心 10min，弃上清，留取沉淀。 b.用PBS 或生理盐水清洗1~2次，1000g离心10min，弃上清，留取沉淀。

c.加入 200~300μl的 PBS或生理盐水匀浆，冰浴条件下超声破碎细胞，功率300W，每次3~5s，间隔30s，重复3~5次;亦可手动匀浆，制备好的匀浆液不可离心;亦可用1~2% Triton X-100冰浴30~60min,制备好的裂解液不可离心。

③组织样品:准确称取适量组织样品，按质量(g):生理盐水或PBS(ml)=1:9的比例，加入生理盐水或 PBS，冰浴条件下手动或机械匀浆，2500~3000g离心10min,取上清。

2、加样:参考下表设置空白管、标准管、测定管，依次加入各种溶液，充分混匀,37℃水浴锅或 45℃恒温箱中孵育 15min。

3、测定:冷却后加入1.0ml 比色皿中，测定505nm处吸光度，以空白管调零，读取标准管、测定管的吸光度，分别记为A_标准、A_测定

计算:

Glu(mmol/L)=A_测定/A_标准×5

Glu(mg/L)=A_测定/A_标准×900

参考区间:

健康成年人空腹葡萄糖:3.9~6.1mmol/L(70~110mg/dl)

备注:Glu 标准(5mmol/L)=90mg/dl=900mg/L

性能指标:

注意事项:

1. 配制好的 GOD-POD 工作液，4℃避光保存，1周有效;低温试剂避免反复冻融，以免失效或效率下降.

2、 测定标本用血清或以草酸钾-氟化钠抗凝的血浆(可抑制葡萄糖的分解)，可直接用于检测脑脊液中的葡萄糖含量;待测样品如不能及时测定应置于2~8℃保存,3天内稳定。

3. 尿葡萄糖目前多采用此法进行定量测定，但不能直接检测，需先用班氏法对尿液样品做半定量试验，按测出的大概含量，用蒸馏水稀释尿液使葡萄糖含量在3mg/ml 以下，再进行检测，计算结果乘以稀释倍数即可，因为未经处理的尿液中尿酸等还原性物质的浓度较高，影响过氧化物酶反应，可能会造成结果假性偏低。

4、随着时间的延长，低浓度样品亦会显红色，所以15min后应及时检测，时间不宜过久。

5、采用酶标仪未调零情况下Leagene 空白参考范围在0.04~0.09之间，5mmol/L标准参考范围在0.25~0.45之间，由于仪器设备、操作方法等不同，参考范围会有差异。

6、该试剂盒测定下限为0.1mmol/L，测定上限为30mmol/L，以肉眼观察，浓度≤0.6mmol/L几乎呈无色，浓度在0.7mmol/L即可显淡红色，浓度≥2.5mmol/L可显红色，一般情况下接近上限比接近下限更准确。

7、本法线性范围可达 30mmol/L，如果样品葡萄糖浓度过高，结果可能呈假性降低，应用生理盐水或 PBS 等稀释后重测，结果乘以稀释倍数。

8、试剂开封后请尽快使用，以防影响后续实验效果。

9、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

有效期: 12个月有效。低温运输，按要求保存。