BL21(DE3)感受态细胞

BL21(DE3)感受态细胞

基因型：

F^-ompT hsdSB(r_B^- m_B^- )gal dcm(DE3) 

产品说明：

BL21（DE3）感受态细胞用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体(如pET系列)的基因。λ噬菌体DE3区含有T7噬菌体RNA聚合酶，该区整合于BL21的染色体上，所以称为BL21(DE3)。可同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶，用于pET系列，pGEX，pMAL等质粒的蛋白表达。BL21（DE3）感受态细胞由特殊工艺制作，经pUC19质粒检测转化效率达10⁷cfu/μg。

操作方法：

1. 取100μl冰上融化的BL21（DE3）感受态细胞，加入目的质粒并轻轻混匀，冰上静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基（2YT或LB），混匀后37℃，200rpm复苏60分钟。
4. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5. 将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。