AH109-pBridge 系统酵母三杂培养基套装

AH109-pBridge 系统酵母三杂培养基套装 Plus（含 3-AT ，X-α-gal）

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储存温度：蓝冰运输；各组分按照标签所示温度进行储存

 

产品组分说明：

1.  产品组分设计针对于已知蛋白验证性实验，如需要筛库，部分筛选培养基需求量大，可单独购买。

2.  产品组分设计转化方案是共转，简化培养基使用种类和操作流程。

3.  如需要分步转化，单独检测自激活，培养基略有不同，可在购买前跟本公司协商调换试剂盒培养基成分。

4.  酵母三杂针对于 Bridge 蛋白互作，实验一般很顺畅，对于Inhititor/blocker蛋白互作，实验常常会遇到问题。

 

产品组成：（0.5 L/pouch）

产品组成	规格（1 Set）
YPDA Broth	1 pouch
SD/-Met with Agar	1 pouch
SD/-Leu/-Met/-Trp with Agar	2 pouches
SD/-His/-Leu/-Met/-Trp with Agar	1 pouch
SD/-Ade/-His/-Leu/-Met/-Trp with Agar	2 pouches
SD/-Ade/-His/-Leu/-Trp with Agar	1 pouch
2.5 M 3-AT 溶液(过滤除菌)	5 mL
X-α-gal 溶液（20mg/ml ，过滤除菌）	1 mL
说明书	1份

 

使用说明：

AH109-pBridge 系统酵母三杂培养基套装包含酵母三杂验证性实验所需要的全部培养基。整套 销售，性价比更高。培养基以非常方便使用的铝箔袋形式包装，每个独立包装可以配制 0.5 L 的培养基。 使用时仅需要将袋中的所有干粉倒入三角瓶或培养瓶中，加入0.5 L的ddH2O，然后121℃灭菌 15 分钟即可。无需称量和调整 pH 值。

 

本套装在基础上增加了 3-AT（用于自激活抑制）和 X-α-gal（互作蓝白斑显色验证）。

 

使用方法：

YPDA Broth

1. YPDA 每袋干粉倒入三角瓶或培养瓶中，加0.5L的去离子水中溶解。

2. 如有必要，调pH至6.5。121℃高压灭菌十五分钟。

3.  避光、室温条件下储存灭菌培养基备用。

 

SD with Agar：

1.每袋干粉倒入三角瓶中，加0.5 L 的去离子水，搅拌溶解（琼脂高温灭菌后溶解。

2.如有必要，调节pH至5.8。121℃高压灭菌15分钟。

3.冷却到50℃把培养基倒入平板中，室温使其凝固。封口膜封好后倒置保存在4℃冰箱。

 

 

 

3-AT 的使用方法：

1.计算所需平板的数量，计算配置培养基体积；

2.设置3-AT 的浓度梯度(建议设置10-50mM的浓度梯度，常见浓度约30mM )；

3.灭菌筛选培养基，待培养基冷却到55℃左右，加入3-AT母液，摇匀后倒板；

4.标记每个平板的3-AT 浓度，超净台冷却凝固后，将转化或培养物涂板；

5.28-30℃培养3-5天。

 

X-a-gal的使用方法：

（一）涂布于预制平板：

1. 储存液配制：溶解24mgX-α-gal于6mLDMF ，终浓度为4mg/mL。

2. 涂布200ul（15cm）或者100ul（10cm）X-α-gal储存液于预制平板上。

3. 置于37℃培养箱至液体被吸收（DMF挥发性低，最长可放4小时）。

4. 将转化细菌或酵母涂于平板上，于37℃或30℃培养直至蓝色菌斑出现。

（二）直接加入培养基中：

1. 储存液配制：溶解60mgX-α-gal于3mL DMF，终浓度为20mg/mL。

2. 将已灭菌固体培养基冷却至50-55 ℃。

3. 加入2-10ml X-α-Gal 储存液，混匀，快速倒平板。