D-荧光素钾盐
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D-荧光素钾盐
Hyymb98
CAS115144-35-9
中文名称D-荧光素钾盐
英文名称D-Luciferin potassium
别名D-Luciferin Potassium Salt;D-Luciferin K Salt;Firefly luciferin potassium;Beetle Luciferin potassium
D-荧光素(D-Luciferin)是萤火虫荧光素酶底物,其量子效率为0.88,是Luminol的20倍。反应原理为镁离子存在下荧光素酶使荧光素与ATP反应,接着它被氧化形成二氧杂环丁烷结构并发出黄绿色的光。Luciferin-luciferase发光用于ATP监控以测定细胞活力以及细菌计数。它还用于报告基因检测。可与小动物活体成像系统配套使用,用于标记LUC基因后的体内活体荧光检测。也应用于体外分析,高通量测序和各种污染检测。
D-荧光素有三种产品形式,D-荧光素(D-Luciferin, free acid)、D-荧光素钾盐(D-Luciferin, potassium salt)和D-荧光素钠盐(D-Luciferin, sodium salt),三种形式都易溶于水,在绝大多数的应用上都没有实质性的差别。它们的激发和发射波长分别为328nm和533nm。
分子式C11H7KN2O3S2
分子量318.41
规格10mg ; 25mg ;
溶解性Soluble in Water ≥10mg/mL(Need ultrasonic)
纯度≥98%
外观(性状)Light yellow to yellow Solid
储存条件
Powder:-20℃,1 year;Insolvent(母液):-20℃,6 months;-80℃,1 year
D-荧光素(D-Luciferin)是萤光素酶(Luciferase)的常用底物,普遍用于整个生物技术领域,特别是体内活体成像技术。在镁离子存在下荧光素酶使荧光素与ATP反应,接着它被氧化形成二氧杂环丁烷结构并发出黄绿色的光。Luciferin由luc基因编码,该基因作为报告基因在多种细胞中存在。由于化学发光的低背景性,luc基因在很低的表达水平下就可以被监测到。
应用:1)活细胞、组织或生物体内luc标记基因和萤光素酶-融合基因体内/体外表达的成像分析
2)报告基因分析,免疫分析和ATP萤光卫生监测分析。
使用说明(仅供参考)
体外发光检测
(1)用314 µL无菌水溶解10 mg D-萤光素钾盐,配制成100 mM的储存液(200×)。
注:未使用的储存液建议分装储存在-20℃,避免反复冻融。
(2)用细胞培养基1∶200稀释储存液,得到1×萤光素工作液。
(3)去除培养细胞的培养基。
(4)向细胞内添加适量1×萤光素工作液,然后进行图像分析
注:在图像分析前,细胞在37℃短时间孵育后检测可增强信号。
活体成像分析
(1)用667 µL无菌的D-PBS(不含Mg2+、Ca2+ )溶解10 mgD-荧光素钾盐,得到D-萤光素钾盐工作液(15 mg/mL),0.2 µm滤膜过滤除菌。
(2)参照下表,根据不同的注射方式,注射不同的体积。
(3)注射入体内5-15min后,进行成像分析。
注射方式
注射剂量(仅供参考)
静脉注射
按10 μL/g体重浓度,加入相应体积的15mg/mL萤光素工作液
腹腔注射
按10 μL/g体重浓度,加入相应体积的15mg/mL萤光素工作液
肌肉注射
50 μL,浓度为1–2 mg/mL萤光素工作液
鼻内注射
50 μL,浓度为3 mg/mL萤光素工作液
注意事项
1.工作液最终浓度建议根据不同实验体系进行优化。
2.荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
3.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
4.本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。