ATCC25922感受态细胞

ATCC25922感受态细胞

ATCC25922 Chemically Competent Cell

Hyywb93-10*100ul

产品说明

ATCC25922菌株是最常用用的药敏质控菌株，主要用于药物的敏感度测试；也可用于培养基、染色剂、生化试剂和各种大肠相关试剂盒的性能测试。ATCC25922未经人工改造，为野生型菌株，是头孢氨苄、卡那霉素、庆大霉素、氯霉素、四环素、新霉素等抗生素的敏感型标准菌种，不含核酸酶endA1突变，体内核酸酶含量较高，提取质粒时推荐使用质粒提取试剂盒中去蛋白液以去除菌体内大量的核酸酶。ATCC25922感受态细胞经特殊工艺制作，pUC19质粒（2686bp，AmpR）检测转化效率>1×107 cfu/μg DNA。 

操作方法

1. ATCC25922感受态细胞从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA（质粒或连接产物）并用手拨打EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。

2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。

3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 ( 2Y T或 L B)，混匀后37℃，200 rpm复苏60分钟。

4. 5000 rpm离心1分钟收集菌体，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2Y T或L B培养基上。

注意事项

1. 感受态细胞最好在冰中缓慢融化。插入冰中8分钟内加入目标DNA，不可在冰中放置时间过长，长时间存放会降低转化效率。

2. 混入目的DNA时应轻柔操作。

3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。

4. 若要获得大量，高纯度质粒，建议在T B培养基（唯地CAT#：CM1018L）中摇菌培养（以标准质粒PUC19为例：在T B营养液中过夜培养的菌体浓度和质粒产量为L B的3-4倍，SOC的2倍）