SS320感受态细胞
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SS320感受态细胞
货号:huayueyang09359 10*100ul 990元
SS320 噬菌体感受态细胞Chemically Competent Cell
SS320 100μl/支保存条件(保质期): -80℃(6个月)
规格:10*100ul
[F'proAB+lacIqlacZΔM15 Tn10 (tetr)] hsdR mcrB araD139Δ(araABC-leu)7679ΔlacX74 galUgalK rpsL thi
SS320来源于MC1061F-菌株,将F'因子转入MC1061F-既是SS320(也叫MC1061F´),是主要的噬菌体展示用菌株,同时也可用于质粒构建,蛋白表达等实验,lacIqZΔM15的存在使其可以用于蓝白斑筛选等实验;但不含核酸酶endA1突变,体内核酸酶含量较高,提取质粒时推荐使用质粒提取试剂盒中去蛋白液以去除菌体内核酸酶。SS320菌株具有四环素抗性。
SS320 噬菌体感受态细胞 操作方法
1. SS320感受态细胞从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手拨打EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打),冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB),混匀后37℃,200 rpm复苏60分钟。
4. 5000 rpm离心1分钟收集菌体,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5. 将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作,将平板放37℃培养至少15 h。
SS320 噬菌体感受态细胞 注意事项
1. 感受态细胞最好在冰中缓慢融化。插入冰中8分钟内加入目标DNA,不可在冰中放置时间过长,长时间存放会降低转化效率。
2. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
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