发根农杆菌R1601感受态细胞

发根农杆菌R1601感受态细胞

Huayueyang0034

R1601: 100μlx10 支

保存条件(保质期): -80℃(12个月)

产品说明

R1601 为发根农杆菌，具有广泛的宿主范围，同时具有Rif抗性。本公司生产的R1601化学转化感受态细胞经特殊工艺制作，pCAMBIA2301质粒(卡那霉素抗性)检测，转化效率>103cfu/μg DNA。

发根农杆菌R1601感受态细胞

操作方法

1.取-80℃保存的农杆菌感受态于冰上融化，每100ul感受态加入 l-5μl(<300μg)质粒DNA，轻弹混匀，冰浴15min。

2.将上述混合物转移至液氮中急冻5min，再37℃热击5min，迅速转移至冰上2min。

3.加入800μl无抗生素的YEB液体培养基，28℃，220rpm 振荡培养 3-4h。

4.6000rpm离心一分钟收菌，留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块涂布于含相应抗生素的YEB平板上，28℃倒置培养 2d。(当平板只含有50ug/ml kan时，28℃培养48h即可;平板中同时加入kan和Rif时，Rif的用量为10μg/ml即可)。

发根农杆菌R1601感受态细胞

注意事项

1.加入质粒的体积不应大于感受态体积的 1/10。

2.混入质粒时应轻柔操作。

3.平板上阳性克隆密度过大时，由于营养不足，阳性克隆生长变慢，菌落变小，为了获得大的菌落，应减少质粒用量。

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