网站首页    K599发根农杆菌感受态细胞

K599发根农杆菌感受态细胞

K599发根农杆菌感受态细胞
售价:
¥ 0.00
原价: ¥0.00
关注:0
收藏
货号规格
数量:
  • K599发根农杆菌感受态细胞 WB  化学转化热激法

    K599 Chemically Competent Cell

    K599 Competent Cell                                      100μl/ 

    保存条件(保质期)                                   -80℃12个月) 

    K599发根农杆菌感受态细胞基因型 

    Agrobacterium rhizogenes (strR) pRi2659 (agropine type) 

    K599发根农杆菌感受态细胞产品说明 

    发根农杆菌是根瘤菌科(Rhizobiaceae)农杆菌属(agrobacterium)的一种革兰氏阴性土壤细菌,它能够感染大多数双子叶植物和少数单子叶植物以及个别裸子植物。K599发根农杆菌(NCPPB2659)含有pRi2659农杆碱型Ri质粒,具有广泛的宿主范围(葫芦科,豆科,茄科等),同时具有链霉素抗性。本公司生产的K599化学转化感受态细胞经特殊工艺制作,pCAMBIA2301质粒(12739bpKanR)检测转化效率>103 cfu/μg DNA 

    K599发根农杆菌感受态细胞

    常规操作方法 

    1.-80℃保存的K599发根农杆菌感受态于室温或手心片刻待其部分融化,处于冰水混合状态时插入冰中。 

    2.  100μl感受态加入0.01-1 μg质粒DNA(转化效率较高,第一次使用前最好做预实验确定所加质粒的量),用手快速、剧烈拨打管底混匀或用枪吹吸混匀,依次放于冰中静置5分钟、液氮5分钟、37℃水浴5分钟、冰浴5分钟。 

    3. 冰浴中拿出放室温,加入700μl 无抗生素的TY液体培养基,于28℃振荡培养2小时。 

    4. 6000 rpm 离心一分钟收菌,留取 100 μl 左右上清轻轻吹打重悬菌块涂布于含相应抗生素的 TY平板上,倒置放于28℃培养箱培养2-3  

    K599发根农杆菌感受态细胞

    农杆菌相关抗生素配方: 华越洋抗生素溶液,粉末均有销售

    抗生素 

    配方 

    原液 

    工作液 

    羧苄青霉素(carb 

    双蒸水溶解,0.22 μm滤膜过滤除菌 

    100 mg/ml 

    50 μg/ml 

    硫酸卡那霉素(kan)

    双蒸水溶解,0.22 μm滤膜过滤除菌 

    100 mg/ml 

    50 μg/ml 

    壮观霉素(spec) 

    双蒸水溶解,0.22 μm滤膜过滤除菌 

    100 mg/ml 

    75 μg/ml 

    链霉素(strep) 

    双蒸水溶解,0.22 μm滤膜过滤除菌 

    100 mg/ml 

    50 μg/ml 

    利福平(rif) 

    DMSO溶解,0.22 μm滤膜过滤除菌 

    60 mg/ml 

    20 μg/ml 

    庆大霉素(gent) 

    双蒸水溶解,0.22 μm滤膜过滤除菌 

    100 mg/ml 

    40 μg/ml 

    氯霉素(cam 

    无水乙醇溶解,0.22 μm滤膜过滤除菌 

    100 mg/ml 

    68 ug/ml 

    K599发根农杆菌感受态细胞

    常用农杆菌抗性: (R:抗;S:敏感。) 

    农杆菌菌株 

    羧苄青霉素(carb) 

    链霉素(strep) 

    利福平(rif) 

    氯霉素(cam) 

    硫酸卡那霉素(kan) 

    Ar.A4 

    S 

    S 

    S 

    S 

    R 

    MSU440 

    S 

    R 

    S 

    S 

    S 

    Ar.Qual 

    S 

    R 

    S 

    R 

    S 

    C58C1 

    S 

    R 

    R 

    S 

    S 

    ATCC15834 

    S 

    S 

    S 

    S 

    S 

    K599 

    S 

    R 

    S 

    S 

    S 

    Ar.1193 

    R 

    R 

    R 

    S 

    S 

    K599发根农杆菌感受态细胞

    ● TY配方(1L

    Tryptone                5g 

    Yeast extract          3g 

    补水到1L体积,完全溶解后,121度、20分钟高温灭菌 

    配制1M的氯化钙水溶液,121度、20分钟高温灭菌 

    1L 灭菌的TY液体营养液中加入10ml 无菌的1M氯化钙水溶液即可。 

    若配制TY固体培养基,则加入15g 琼脂粉。 

    K599发根农杆菌感受态细胞

    注意事项 

    1. 加入质粒时体积不应大于感受态体积的1/10;质粒不纯或存在乙醇等有机物污染,转化效率急剧下降;质粒增大一倍,转化效率下降一个数量级。 

    2. 混匀质粒时应用手指快速拨打管底或用枪吹吸混匀,务必使质粒快速、均匀分散开,与感受态细胞充分接触。转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。 

    3. 平板上阳性克隆密度过大时,由于营养不足,阳性克隆生长变慢,菌落变小,为了获得大的菌落,应减少质粒用量或降低涂板的菌量。 

    4.  K599具有链霉素抗性,不可用于具有链霉素抗性质粒的转化。

    K599发根农杆菌感受态细胞 

     

Control Render Error!ControlType:productSlideBind,StyleName:Style1,ColorName:Item0,Message:InitError, ControlType:productSlideBind Error:未将对象引用设置到对象的实例。
加入购物车